Die Hefezellwand enthält hauptsächlich Glucan sowie etwas Mannoprotein, Protein, Lipide und eine kleine Menge Chitin. Hefeglucan ist hauptsächlich alkaliunlösliches Glucan. Alkaliunlösliches Glucan ist ein aktives Polysaccharid. Der Schlüssel zur Herstellung besteht darin, Verunreinigungen wie Protein, Mannan und Lipide zu entfernen. Derzeit umfassen die wichtigsten Methoden zur Herstellung von Hefeglucan im In- und Ausland die Säure-Base-Methode, die enzymatische Methode und die oxidative Extraktion.
1.1 Säure-Base-Methode
Mannaners [1] verwendete erstmals die Säure-Base-Methode, um Glucan aus Hefe zu extrahieren, und nach der Verbesserung durch Williams et al. wurde ein stabiles Verfahren entwickelt. Das von CHUNG [2] untersuchte Alkalibehandlungsverfahren: Nehmen Sie 80 g Hefezellwand und suspendieren Sie diese in 1000 ml 4%iger NaOH-Lösung, halten Sie sie 1 Stunde bei 95 Grad, zentrifugieren Sie sie, suspendieren Sie die unlöslichen Stoffe in 2000 ml 3%iger NaOH-Lösung, halten Sie sie 3 Stunden bei 75 Grad, zentrifugieren Sie sie, suspendieren Sie die unlöslichen Stoffe in destilliertem Wasser, halten Sie den pH-Wert mit Salzsäure bei 4,5, halten Sie sie 1 Stunde bei 75 Grad, zentrifugieren Sie sie, waschen Sie sie, entwässern Sie sie und trocknen Sie sie, um Hefeglucan zu erhalten. Bei der Säurebehandlung beeinflusst die Wahl der Säure die Glucanausbeute stark. Ist die Säure zu schwach, werden das säurelösliche Glykogen und Beta-1,6--Glucan nicht vollständig entfernt; Ein zu starker Säuregehalt führt zum Abbau des alkaliunlöslichen Glucans und verringert den Ertrag. Daher ist Essigsäure die beste Wahl zur Einstellung des pH-Werts=4,5.
1.2 Enzymmethode
Freimund [3] behandelt Hefezellwände enzymatisch und stellt Hefeglucan her: Man nehme 1,3 kg Hefezellwände und gebe 8,8 l Wasser hinzu, passe den pH-Wert an=7.0, halte sie fünf Stunden bei 125 Grad, spüle sie zweimal und zentrifugiere sie, gebe 10 l unlösliche Stoffe mit Wasser hinzu, behandle sie fünf Stunden mit alkalischer Protease - Savinase, zentrifugiere sie, spüle und trockne sie und spüle sie anschließend mit Ethanol oder Aceton, um Dextranproben mit einem Gehalt von über 85 % zu erhalten. Tang Zhiyu [4] extrahierte die Hefezellwände mit einer Enzym-Base-Kombinationsmethode, behandelte die autolysierte Hefe 18 Stunden lang mit Papain, sammelte und präzipitierte sie und behandelte sie drei Stunden lang bei hoher Temperatur mit 2 % NaOH. Der Polysaccharidgehalt der Probe lag bei über 87 % und die Ausbeute betrug 10 %. Zhao Guangyuan [5] behandelte die Hefezellwand 24 Stunden lang bei 57 Grad mit Protease, zentrifugierte dann den Niederschlag mit 2% NaOH 3,5 Stunden lang bei 60 Grad, zentrifugierte, wusch und trocknete, um eine Hefe-Glucan-Probe zu erhalten.
Durch die enzymatische Behandlung der Hefezellwand kann eine große Menge an Protein entfernt werden, wodurch die Konzentration und der Einsatz nachfolgender Alkalien reduziert werden. Die Molekularstruktur des Hefe-Glucan-Produkts ist vollständiger und die Molekularstruktur von Glucan ist eng mit seiner biologischen Aktivität verbunden. Daher ist die enzymatische Methode besser für die Extraktion und Reinigung von Hefe-Glucan in großem Maßstab geeignet.
[1] Manners, DJ, Masson, AJ, & Patterson, JC (1973a). Struktur eines -(1-3)-D-Glucans aus Hefezellwänden. Biochemical Journal, 135(1):19-30.
[2] CHUNG, Bong - Hyun. PARK, Jeong Hoon.et al. Zusammensetzung, die lösliches Glucan-Oligomer aus Saccharomyces cerevisiae IS2 zur Immunaktivierung oder Vorbeugung und Behandlung von Krebs enthält, und das Herstellungsverfahren dafür. PCT [P].App l.WO2004.
[3] Freimund, S., Sauter, M., Kappeli, O., & Dulter, H. (2003). Ein neues nicht-abbauendes Isolierungsverfahren für 1,3-bD-Glucan mit hoher Reinheit aus Bäckerhefe Saccharomyces cerevisiae. Carbohydrate Polymers, 54, 159–171.
[4] Tang Zhiyu, Wang Huai, Xiong Shanbai. Extraktion von Bierhefe mittels Autolyse-Enzym-Alkali-Methode - Untersuchung des Prozesses von 1,3-Glucan [J]. Modern Food Science and Technology, 2006 (02)
[5] Zhao Guangyuan. Untersuchung der Herstellung von alkaliunlöslichem Glucan aus Autolyserückständen von Abfallbierhefe [J]. Journal of Huazhong Agricultural University (Natural Science Edition), 1997 (2)
